1% TX100 में कोशिका लाइसेट को एक निश्चित एन्ज़ाइमी क्रियाशीलता वाले सम्मिश्र को अलग करने के लिए एक बंधुता कॉलम पर शुद्ध किया गया था। शुद्ध किए गए एंजाइम सम्मिश्र को 10-50% सुक्रोज  सतत अनुप्रवण पर पृथक किया गया था। नीचे 280 nm या 260 nm पर एक अवशोषण फिल्टर का उपयोग करके UV स्पेक्ट्रम दिखाया गया है।

निम्नलिखित में से अणुओं का कौन सा संयोजन ऊपर दर्शाए गए स्पेक्ट्रम उत्पन्न करेगा?

सही उत्तर है प्रोटीन- RNA

अवधारणा:

UV अवशोषण विशेषताएँ:

• प्रोटीन मुख्य रूप से एरोमैटिक अमीनो एसिड (जैसे ट्रिप्टोफैन, टायरोसिन और फेनिलएलनिन) की उपस्थिति के कारण 280 nm पर अवशोषित होते हैं। 280 nm पर मजबूत अवशोषण प्रोटीन की उपस्थिति को इंगित करता है।
• न्यूक्लिक एसिड न्यूक्लियोटाइड क्षार की उपस्थिति के कारण (RNA / DNA) 260 nm पर दृढ़ता से अवशोषित होते हैं। यदि स्पेक्ट्रम 260 nm पर महत्वपूर्ण अवशोषण दिखाता है, तो यह न्यूक्लिक एसिड (RNA या DNA) की उपस्थिति का सुझाव देता है।

स्पष्टीकरण:

• दिखाए गए दो स्पेक्ट्रम संभवतः 260 nm और 280 nm (प्रत्येक फिल्टर के लिए एक) पर अवशोषण के अनुरूप हैं।
• यदि स्पेक्ट्रम में से कोई एक 260 nm पर शिखर दिखाता है, तो यह RNA ( या DNA ) की उपस्थिति का दृढ़ता से संकेत देता है, क्योंकि न्यूक्लिक एसिड इस तरंगदैर्ध्य पर अधिक अवशोषित करते हैं।
• यदि 280 nm पर एक और शिखर दिखाई देता है, तो यह प्रोटीन की उपस्थिति का संकेत देता है।
• 260 nm और 280 nm पर शिखर का संयोजन प्रोटीन और  आरएनए  के एक जटिल संयोजन का सुझाव देता है। यह एक राइबोप्रोटीन सम्मिश्र या एक प्रोटीन हो सकता है जो RNA के साथ परस्पर क्रिया करता है, जिससे संयुक्त अवशोषण पैटर्न बनता है।